紫外分光光度計基本原理:
分子的紫外可見(jiàn)吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見(jiàn)輻射光后,發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。它是帶狀光譜,反映了分子中某些基團的信息,可以用標準光譜圖再結合其它手段進(jìn)行定性分析。
朗伯-比爾定律:當一束平行單色光通過(guò)含有吸光物質(zhì)的稀溶液時(shí),溶液的吸光度與吸光物質(zhì)濃度、液層厚度乘積成正比,即A= kcl
式中比例常數k與吸光物質(zhì)的本性,入射光波長(cháng)及溫度等因素有關(guān)。c為吸光物質(zhì)濃度,l為透光液層厚度。
紫外分光光度計應用:
分光光度計已經(jīng)成為現代分子生物實(shí)驗室常規儀器。常用于核酸、蛋白定量以及細菌生長(cháng)濃度的定量。我們實(shí)驗室主要是用來(lái)測物質(zhì)的光度以求得物質(zhì)的濃度或者酶活。